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AM4-64

MCE 国际站：AM4-64

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-D3383

生物活性： AM4-64 是一种可固定的阳离子苯乙烯基荧光染料，适用于神经末梢，可用于囊泡循环评估、内吞途径追踪和内吞作用检测。AM4-64 可插入质膜，通过活性依赖性或能量依赖性内吞作用进入细胞，并积聚在囊泡、内体区室、液泡膜、线粒体和内溶酶体结构中。AM4-64 在膜结合状态下荧光增强。AM4-64 适用于神经元、植物和真菌细胞及组织的相关研究（激发/发射波长 = 510/750 nm）[1][2][3][4][5][6]。

体外研究(In Vitro)：Others Others 指南 (以下为推荐实验方案，仅作指导使用，需根据您的具体需求进行调整)1. 储备液配制 1.1 溶剂：无水 DMSO。1.2 浓度建议：1-10 mM。2. 工作液配制 2.1 稀释液：可选稀释液包括 Murashige and Skoog (MS) 液体培养基、Neurobasal 培养基、无血清培养基或 PBS、Tyrode’s 溶液以及液体察氏营养培养基。2.2 工作浓度：5-24 μM。2.3 注意事项：根据需要调整工作液浓度；使用前新鲜配制。3. 染色步骤 3.1 贴壁神经元-星形胶质细胞共培养体系[1]： 3.1.1 样品类型：贴壁活神经元-星形胶质细胞共培养物；无需胰酶消化。 3.1.2 孵育条件：在含 20 mM KCl 的体系中，用 AM4-64 工作液孵育 5 min。3.2 野生型烟草 BY-2 细胞[2]： 3.2.1 样品类型：烟草 BY-2 细胞3.2.2 冰上用 12 μM AM4-64 工作液孵育 10 min。 3.2.3 洗涤步骤：用预冷 MS 液体培养基多次洗涤细胞，以去除未被内化的染料。3.3 贴壁人皮质神经元 (HCNs)[3]： 3.3.1 样品类型：贴壁培养的 HCNs；染色前无需胰酶消化。 3.3.2 孵育条件：将 5 μM AM4-64 工作液与 500 nM AβO，以及 100 μM 谷氨酸或 20 mM KCl 共同孵育 5 min确。对于 Tetrodotoxin 预孵育实验，在加入 AM4-64 (加或不加 AβO) 前，先用 1 μM Tetrodotoxin 预孵育神经元 20 min。 3.3.3 洗涤步骤：孵育后用预冷 HBSS 快速洗涤培养物 1 次。3.4 贴壁真菌菌丝[4]： 3.4.1 样品类型：生长在置于固体营养培养基上的玻璃纸表面的贴壁真菌菌丝。 3.4.2 孵育条件：室温下用 6 μM、12 μM 或 24 μM AM4-64 工作液孵育。3.5 贴壁神经生长因子 (NGF) 分化 PC12 细胞[5]： 3.5.1 样品类型：贴壁 NGF 分化 PC12 细胞。 3.5.2 孵育条件： 3.5.2.1 先用 Tyrode’s 溶液洗涤细胞，随后在含 10 μM AM4-64 的 Tyrode’s 溶液中孵育至少 2 min。 3.5.2.2 用含 10 μM AM4-64 的去极化高钾 Tyrode’s 溶液 (70 mM KCl、59 mM NaCl) 刺激 2 min。 3.5.2.3 在含 10 μM AM4-64 的正常 Tyrode’s 溶液中孵育至少 15 min (时长可调整)，以标记慢速内吞过程。 3.5.2.4 在含 0.5 mM SCAS 的低钙 Tyrode’s 溶液 (0.2 mM CaCl2、5 mM MgCl2) 中孵育至少 5 min，淬灭未被内化的染料。 3.5.2.5 用 3%多聚甲醛和 0.5%戊二醛溶液固定细胞 1 h。 3.5.3 洗涤步骤：固定后用 PBS 洗涤细胞。3.6 贴壁立枯丝核菌菌丝细胞[6]： 3.6.1 样品类型：生长在琼脂培养基上的贴壁立枯丝核菌 (R. solani) 菌丝细胞；直接使用带有幼嫩菌丝的薄琼脂块。 3.6.2 孵育条件：在冰上避光条件下，用 12 μM AM4-64 工作液孵育 8 min。 3.6.3 洗涤步骤：用预冷液体察氏营养培养基洗涤样品 3 次。4. 对照设置 4.1 人皮质神经元染色[3]：设置无刺激的对照 HCNs、经谷氨酸刺激的 HCNs 以及经 Tetrodotoxin 预孵育的 HCNs，以验证囊泡循环染色效果。4.2 立枯丝核菌菌丝染色[6]： 4.2.1 抑制剂实验对照：先将菌丝在不含抑制剂的营养培养基中预孵育，再按照标准流程用 AM4-64 染色。 4.2.2 细胞质膜通透对照：在预冷营养培养基中用 10 μg/mL 碘化丙啶孵育样品 8 min，随后通过显微镜观察。5. 检测与分析 5.1 仪器类型：荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜、落射荧光显微镜。5.2 结果分析： 5.2.1 神经元-星形胶质细胞共培养体系[1]：AM4-64 荧光以点状信号标记循环突触囊泡；正常共培养体系中，每 50 μm 树突上的 AM4-64 阳性点状信号密度高于唐氏综合征共培养体系。 5.2.2 烟草 BY-2 细胞[2]：可检测到内化 AM4-64 产生的红色荧光；随时间推移，染料首先定位于质膜，随后定位于 SCAMP1 标记的早期内体，之后定位于 VSR 标记的前液泡区室 (PVCs)，15 至 60 min 内，AM4-64 与 SCAMP1 的共定位百分比从约 40%升至约 90%，与 VSR 的共定位百分比从 0%升至约 80%。 5.2.3 人皮质神经元[3]：AM4-64 发出红色荧光，以细小点状信号标记神经元突起上的循环突触囊泡；谷氨酸刺激会增加 AM4-64 阳性点状信号的数量，而 TTX 预孵育会减少其数量；大多数 AβO 点状信号与 AM4-64 阳性囊泡在空间上相互分离。 5.2.4 真菌菌丝[4]：AM4-64 标记初级内吞囊泡、液泡膜，部分情况下可标记线粒体；通过初级囊泡浓度、初始囊泡出现速率以及液泡膜信号出现时间 (S. hirsutum 为 15-25 min，C. comatus 为 30-40 min，P. ostreatus 为 20-30 min) 评估内吞活性。 5.2.5 NGF 分化 PC12 细胞[5]：AM4-64 荧光表现为红色点状信号，定位于神经突起膨大处、细胞间接触部位的突触前样结构以及核周区域；约 32% 的 AM4-64 点状信号与突触素点状信号重叠，其中约 40% 的重叠信号与 Rab3a 点状信号共定位；高钾刺激未观察到 AM4-64 点状信号的刺激依赖性荧光丢失 (褪色) 现象。 5.3.6 立枯丝核菌菌丝[6]：荧光定位过程分为四个内吞阶段：阶段 0 (仅细胞质膜)、阶段 1 (壁旁初级内吞囊泡)、阶段 2 (较大的内膜结构，膜荧光较弱)、阶段 3 (不同大小的液泡，膜荧光极弱)；在 0-15 min 和 15-30 min 两个时间点，量化实验组和对照组中处于各阶段的细胞分布情况。 MedChemExpress (MCE) has not independently confirmed the accuracy of these methods. 仅供参考。

分子量：556.05

Formula：C29H45Cl3N4

运输条件：美国大陆地区的室温；其他地区可能有所不同。

储存方式：请按照分析证书中推荐的条件储存产品。

提供质量检测报告：Data Sheet、产品使用指南

产品活性：AM4-64 是一种可固定的阳离子苯乙烯基的神经末梢荧光染料，可用于囊泡循环评估、内吞途径示踪及内吞作用检测。AM4-64 可插入质膜，通过依赖活性或能量的内吞作用被摄取，并在囊泡、内体区室、液泡膜、线粒体和内溶酶体结构中积累。AM4-64 在膜结合状态下荧光增强。AM4-64 可用于神经元、植物及真菌细胞和组织的相关研究 (Ex/Em = 510/750 nm)。

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热门产品线：抑制剂  | 稳定性同位素标记物  |  脂质  |  糖类

Trending products：Inhibitors  | Isotope-Labeled Compounds  |  Lipids  |  Saccharides

MCE 抑制剂:
MedChemExpress (MCE) 提供抑制剂、激动剂、拮抗剂、激活剂、调节剂、降解剂、配体和底物等多种生物活性化合物，可用于靶点功能验证、信号转导机制研究、细胞表型分析、疾病机制研究、药效评价及活性化合物筛选。

MedChemExpress 信号通路产品覆盖细胞凋亡、自噬、细胞周期与 DNA 损伤、表观遗传、GPCR/G 蛋白、免疫与炎症、JAK/STAT、MAPK/ERK、膜转运体与离子通道、代谢酶与蛋白酶、神经信号、NF-κB、PI3K/Akt/mTOR、PROTAC、蛋白酪氨酸激酶/受体酪氨酸激酶、干细胞/Wnt、TGF-β/Smad 及维生素 D/核受体等研究方向，为肿瘤、感染、炎症与免疫、神经系统疾病、代谢性疾病、心血管疾病和内分泌研究提供多维度的产品选择，助力客户发表文献超 80,000 篇。

相关产品可根据具体情况提供化学结构、作用靶点、生物活性、纯度、溶解度、体内外研究信息、参考文献及质量分析报告 (COA)等资料。

客户发表文献：
[1]. Nature. 2026 Sep;657(8131):549-558.
[2]. Nature. 2026 Sep;657(8132):755-764.
[3]. Nature. 2026 Sep;657(8133):1027-1034.
[4]. Nature. 2026 Sep;657(8131):477-486.
[5].Nature. 2026 Sep;657(8132):789-799.
[6]. Nature. 2026 Sep;657(8131):517-524.
[7]. Nature. 2026 Sep;657(8133):1045-1052.
[8]. Cell. 2026 Sep 14:S0092-8674(26)01003-2.
[9]. Cell. 2026 Sep 3;189(18):5688-5705.e13.
[10]. Cell. 2026 Sep 2:S0092-8674(26)00937-2.

参考文献：
[1]. Garcia O, et al. A role for thrombospondin-1 deficits in astrocyte-mediated spine and synaptic pathology in Down's syndrome. PloS one. 2010 Dec 02;5(12):e14200.
[2]. Lam SK, et al. Rice SCAMP1 defines clathrin-coated, trans-golgi-located tubular-vesicular structures as an early endosome in tobacco BY-2 cells. Plant Cell. 2007 Jan;19(1):296-319.
[3]. Deshpande A, et al. A role for synaptic zinc in activity-dependent Abeta oligomer formation and accumulation at excitatory synapses. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 2009 Apr 01;29(13):4004-15.
[4]. Mazheika I, et al. Nitrogen-obtaining and -conserving strategies in xylotrophic basidiomycetes. Mycologia. 2020;112(3):455-473.
[5]. Ott G, et al. Assessing the Potential of NGF-Differentiated PC12 Cells as a Model for Synaptic Transmission. Molecular neurobiology. 2025 Dec 10;63(1):281.
[6]. Mazheika I, et al. Early endocytosis as a key to understanding mechanisms of plasma membrane tension regulation in filamentous fungi. Biol Cell. 2020 Dec;112(12):409-426.